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        S2果蠅細胞瞬時轉染的背景技術

        日期:2022-07-11 19:32
        瀏覽次數:214
        摘要:
            昆蟲細胞表達系統已被廣泛用于包括組織因子和抗體等在內的眾多人類重組蛋白的表達(kosr等,1997)。目前,昆蟲表達系統主要用于表達亞單位疫苗,包括獸用疫苗以及部分人類疫苗及重組病毒(maranga等,2002;ryan和walsh等,2012;yang等,2013;miller等,2012)。果蠅s2(drosophilaschneider2)細胞是一種常用于異源基因表達的雙翅目果蠅科果蠅屬的昆蟲細胞,可通過構建穩定細胞池的方法進行重組蛋白表達,近年來已成功用于表達一些具有生物活性的受體蛋白、離子通道蛋白、細胞骨架蛋白、轉錄因子、激素和凝血因子等(millar等,1995;millar等,1994;tota等,1995;towers和sattelle等,2002;mennella等,2005;winslow等,1989;change等,2005;zmora等,2007;vatandoost等,2012)。

            但穩定細胞池的生產過程耗時長達幾個月并且產量很低,每升的產量只能達到幾毫克。瞬時轉染在哺乳動物中用于重組蛋白的快速表達的工藝已非常完善,近年來也逐漸應用到昆蟲表達系統中(geisse等,2009;hopkins等,2012;loomis等,2005;shen等,2013)。但由于表達量低和沒有找到高效低成本的的轉染試劑等原因,果蠅s2細胞的瞬時轉染目前只用于構建穩定細胞株之前對表達載體的檢驗(vatandoost等,2012)。S2果蠅細胞的瞬時轉染常用的轉染試劑為磷酸鈣或脂質體,操作繁瑣、價格昂貴,不利于工藝放大,使其應用受到了限制(cherbas等,2007)。目前還沒有低成本的陽離子聚合物轉染試劑在果蠅s2細胞轉染中的應用(hacker等,2013)。

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